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SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
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產品名稱:

SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒

NO.
009
貨號:
CSK00013
中文名稱
檢測試劑盒
英文名詞
SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
CAS號
/
產品貨號:
CSK00013
貨期:
現貨
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2880.00
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產品信息
如何訂購

產品概述(Summary)

產品名稱(Product name)

SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒

貨號(Catalog#)

CSK00013

描述(description)

本試劑盒采用雙抗夾心ELISA定量分析技術,將抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體預先包被在酶標板上,之后將標準品或分析樣本加入到微孔中,樣本中Nucleocapsid蛋白會被預包被的抗體捕獲,清洗掉未結合的物質后,將生物素標記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體加入到微孔中反應,形成夾心復合物,再加入HRP標記的鏈霉親和素,清洗掉未結合的抗體及酶試劑之后,將顯色液添加到微孔中顯色,顯色強度與樣品中Nucleocapsid蛋白濃度成正比。

本試劑盒用于測定支氣管肺泡灌洗液、鼻咽拭子樣本或重組表達樣本中Nucleocapsid蛋白的濃度。

運輸方式(Shipping)

藍冰運輸。

穩定性&儲存(Stability &Storage)

收到試劑盒后請將標準品、檢測溶液 A、檢測溶液 B 以及預包板保存于-20℃,封板膜放置于常溫保存,其余試劑請置于 4 ℃保存備用。

試劑盒按推薦溫度保存6個月,信號強度降低小于 10%。

使用方法(Standard Operating Procedure)

所需設備及試劑
450 nm濾光片酶標儀,含540 nm或570nm校正波長更佳
單道或多道微量移液器,移液器槍頭
去離子水
500 mL量筒
樣品稀釋管或不同規格EP管
吸水紙

一、試劑準備
使用前將所有試劑和樣本置于室溫平衡。
1. 20×濃縮清洗液:如果濃縮清洗液中有晶體析出,平衡至室溫并搖勻,直到晶體完全溶解,25mL濃縮清洗液使用去離子水定容至500mL,得到清洗液。
2. 用2mL標準品/樣本稀釋液溶解Nucleocapsid蛋白標準品凍干粉,溶解后標準品濃度為80ng/mL。輕輕混勻后靜置10分鐘,然后進行標準品的稀釋, 準備 7 個稀釋標準品的 EP 管,每個 EP 管中加入500μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成 80ng/mL、 40ng/mL、20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、2.5 ng/mL、 1.25ng/mL, 標準品/樣本稀釋液(0ng/mL)直接作為空白孔。
3. 檢測溶液A(生物素標記):臨用前震蕩混勻后用掌上離心機瞬時離心,使液體集中于管底,使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
4. 檢測溶液B(HRP標記):臨用前震蕩混勻后用掌上離心機瞬時離心,使液體集中于管底,使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
5. 顯色液:避光保存,顯色時100μL /孔。
6. 終止液:顯色完畢后50μL /孔。

二、實驗步驟
使用前將所有試劑和樣本置于室溫,建議對所有標準品、對照品和樣本進行一式兩份的分析。
1. 按照前面章節的指示準備所有試劑和樣本。
2. 從板架上取下多余的微孔板條,將其放回裝有干燥劑包的鋁箔袋中,然后重新密封保存于-20℃。
3. 每孔加入100μL標準品或樣本,用封板膜封住,37℃孵育60分鐘。
4. 棄去孔內液體,每孔加入 300μL的清洗液,輕微震蕩后棄去孔內液體,將酶標板倒扣在吸水紙上輕拍,使殘留在孔內的液體全部去除,重復洗板 3 次,此過程也可采用尖嘴噴射瓶,多道移液器或自動洗板機來完成。
5. 每孔加入100μL檢測溶液A(生物素標記),用新的封板膜封住,37℃孵育30分鐘。
6. 重復步驟4中的洗板程序。
7. 每孔加入100μL檢測溶液B(HRP標記),用新的封板膜封住,37℃孵育30分鐘。
8. 重復步驟4中的洗板程序。
9. 每孔加入100μL顯色液,37℃避光顯色5-10分鐘。
10. 每孔加入50μL終止液,孔里的顏色應該由藍色變至黃色,如果孔內顏色為綠色或顏色變化不均勻,輕輕震動酶標板使顏色均一。
11. 擦干酶標板底部水氣,立刻用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的O.D.值,如果波長校正可用,則設置為540 nm或570 nm,如果波長校正不可用,則從450 nm的讀數中減去540 nm或570 nm的讀數,這種修正可去除酶標板讀數中的光學偏差,如果沒有校正波長,可直接讀取450 nm的讀數,但讀值有可能不準確。

三、標準曲線制作
每個標準品和樣本的復孔平均O.D.值,減去空白孔平均O.D.值后,以標準品的濃度為橫坐標,O.D.值為縱坐標,繪出標準曲線(R2值越趨近于1曲線越精確),然后再將樣本的平均O.D.值代入標準曲線的回歸方程式,計算出樣品濃度。
如果樣品已經稀釋,從標準曲線上算出的濃度需乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

四、標曲案例
標準曲線僅用于演示,每次實驗均需生成單獨的標準曲線。

 

五、檢測范圍
1.25ng/mL—80ng/mL

六、最低檢測限(MDD)
<1ng/mL
MDD是測試20個零標準(標準品/樣本稀釋液)的平均O.D.值上加兩倍標準差后計算相應的濃度來確定的。

七、精密度
批內差: CV<12%
批間差: CV<15%

八、穩定性
試劑盒按推薦溫度保存6個月,信號強度降低小于10%。

組分和說明(Component and Instruction)

樣品清單及儲存條件

 

樣品名稱

規格

描述

推薦儲存條件

預包板

96孔聚苯乙烯微孔板(12*8孔),預包被抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體

密封狀態放置于-20℃保存

標準品

160ng重組Nucleocapsid蛋白凍干粉(含防腐劑),臨用前復溶于2mL標準品/樣本稀釋液,終濃度為80ng/mL

放置于-20℃保存

檢測溶液A

 

120μL 生物素標記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體(含防腐劑),臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

放置于-20℃保存

檢測溶液B

 

120μL HRP標記的鏈酶親和素(含防腐劑),臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

放置于-20℃保存

標準品/樣本稀釋液

25 mL稀釋液(含防腐劑),用于標準品、待測樣本的稀釋

放置于4℃保存

檢測溶液稀釋液

25 mL稀釋液(含防腐劑),用于檢測溶液A和檢測溶液B的稀釋

放置于4℃保存

濃縮清洗液

25 mL 20×)濃縮清洗液(含防腐劑),臨用前用去離子水1:20稀釋至工作濃度

放置于4℃保存

顯色液

12 mL TMB(四甲基聯苯胺)

放置于4℃保存

終止液

6 mL

放置于4℃保存

封板膜

用于實驗中封閉酶標板

放置于常溫保存

 

*在試劑盒保質期內使用

Note

For research use only .

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