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Human COVID-19 Nucleocapsid (NP) IgG ELISA檢測試劑盒
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產品名稱:

Human COVID-19 Nucleocapsid (NP) IgG ELISA檢測試劑盒

NO.
006
貨號:
CSK00015
中文名稱
檢測試劑盒
英文名詞
Human COVID-19 Nucleocapsid (NP) IgG ELISA檢測試劑盒
CAS號
/
產品貨號:
CSK00015
貨期:
現貨
價格與訂購:
2880.00
數量
-
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100
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產品信息
如何訂購

產品概述(Summary)

產品名稱(Product name)

Human COVID-19 Nucleocapsid (NP) IgG ELISA檢測試劑盒

描述(description)

本試劑盒采用間接ELISA分析技術,將N蛋白預先包被在酶標板上,之后將陽性對照樣本和分析樣本分別加入到微孔中,樣本中N蛋白抗體會和預包被的N蛋白結合,清洗掉未結合的物質,再加入生物素標記的羊抗人二抗,清洗掉未結合的抗體,再加入HRP標記的鏈酶親和素,清洗掉未結合的酶,將顯色底物溶液添加到微孔中顯色,顯色強度與樣品中N蛋白抗體濃度成正比。

本試劑盒用于測定血清和血漿中N蛋白抗體的濃度。

運輸方式(Shipping)

藍冰運輸。

穩定性&儲存(Stability &Storage)

收到試劑盒后請將陽性對照、檢測溶液A、檢測溶液B以及預包板保存于-20℃,封板膜放置于常溫保存,其余試劑請置于 4 ℃保存備用。

試劑盒按推薦溫度保存6個月,信號強度降低小于 10%。

使用方法(Standard Operating Procedure)

所需設備及試劑
450 nm濾光片酶標儀,含540 nm或570nm校正波長更佳
單道或多道微量移液器,移液器槍頭
去離子水
500 mL量筒
樣品稀釋管或不同規格EP管
吸水紙

一、樣品收集和儲存
1)血清樣本:全血室溫放置60分鐘或4℃過夜,然后1000 x g離心15分鐘,取上清檢測,或分裝后于≤-20℃冰箱保存,避免樣品反復凍融。
2)血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿,樣品采集后30分鐘內1000 x g離心15分鐘,取上清檢測,或分裝后于≤-20℃冰箱保存,避免樣品反復凍融。

二、試劑準備
使用前將所有試劑和標本置于室溫平衡。
1.濃縮清洗液: 如果濃縮液中有晶體析出,加熱至室溫并輕輕混合,直到晶體完全溶解,25mL濃縮清洗液使用離子水定容至500mL,得到清洗工作液。
2.陽性對照標準點配置,陽性對照濃度為1mg/mL, 使用樣本稀釋液1:10000稀釋陽性對照得到第一個標準點100ng/mL,依次進行倍比稀釋操作得到共計7個標準點50 ng/mL、25 ng/mL、12.5 ng/mL、6.25 ng/mL、3.125ng/mL、1.5625ng/mL、最后再以100ul樣本稀釋液為零標準(0 ng/mL),共計8個標準點,建議每個標準點至少做2個平行孔。
3.血清,血漿樣本配置:使用樣本稀釋液1:1000稀釋后上樣。
4.檢測溶液A工作液配置,震蕩混勻后用掌上離心機瞬時離心,使液體集中于管底,臨用前取合適體積用檢測溶液稀釋液1:1000稀釋至工作濃度。
5.檢測溶液B工作液配置,震蕩混勻后用掌上離心機瞬時離心,使液體集中于管底,臨用前取合適體積用檢測溶液稀釋液1:2000稀釋至工作濃度。
6.顯色液: 避光保存,顯色時100μL /孔。
7.終止液:顯色完畢后50μL /孔。

三、實驗步驟
使用前將所有試劑和樣品置于室溫。建議對所有標準品、對照品和樣品進行一式兩份的分析。
1. 按照前面章節的指示準備所有試劑和準備工作。
2. 從板架上取下多余的微孔板條,將其放回裝有干燥劑包的箔袋中,然后重新密封保存于-20℃。
3. 每孔加入100μL 陽性對照(共計8點)和待測樣本,用封板膜封住,37℃孵育60分鐘。
4. 棄去孔內液體,每孔加入 300μL的清洗液清洗,輕微震蕩后棄去孔內液體,將酶標板倒扣在吸水紙上輕拍,使殘留在孔內的液體全部去除,重復洗板 3 次,此過程也可采用尖嘴噴射瓶,多道移液器或自動洗板機來完成。
5. 每孔加入100μL檢測溶液A工作液(生物素標記),用新的封板膜封住,37℃孵育30分鐘。
6. 重復步驟4中的洗板程序。
7. 每孔加入100μL檢測溶液B工作液(HRP標記),用新的封板膜封住。37℃孵育30分鐘。
8. 重復步驟4中的洗板程序。
9. 每孔加入100μL顯色液,37℃避光顯色10分鐘。
10. 每孔加入50μL終止液,孔里的顏色應該由藍色變至黃色,如果孔內顏色為綠色或顏色變化不均勻,輕輕震動酶標板板使顏色均一。
11. 擦干酶標板底部水氣,立刻用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度值(O.D.值),如果波長校正可用,則設置為540 nm或570 nm,如果波長校正不可用,則從450 nm的讀數中減去540 nm或570 nm的讀數,這種修正可去除酶標板讀數中的光學偏差,如果沒有校正波長,可直接讀取450 nm的讀數,但讀值有可能會更高、更不準確。

四、標準曲線制作
取每個陽性對照和樣本的復孔平均值O.D.,減去零標準孔平均值O.D.后,以陽性對照的濃度為橫坐標,O.D.值為縱坐標,繪出標準曲線(R2值越趨近于1曲線越精確),然后再將樣品的平均值O.D.帶入標準曲線的回歸方程式,計算出樣品中目標蛋白濃度。
如果樣品已經稀釋,從標準曲線上算出的濃度須乘以稀釋系數,即為樣品的實際濃度。


五、精密度
批內差: CV<12%
批間差: CV<15%

六、穩定性
試劑盒按推薦溫度保存6個月,信號強度降低小于 10%。

七、實驗細節說明
1. 在試劑盒標簽上的有效期內使用,不要與其他廠家的試劑盒混合使用。
2. 如果樣本檢測值超出標準曲線范圍,可使用適當的稀釋液稀釋樣品并重新測定,或預估樣品中抗體濃度,在實驗之前預先稀釋數個梯度同時進行測定。
3. 為避免交叉污染,不同標準品、樣品、試劑的加樣需更換移液槍頭,每管試劑使用單獨的容器儲存。
4. 在孵育過程中貼緊封板膜。
5. 顯色液避光保存,臨用前15分鐘從冰箱取出在室溫平衡。
6. 濃縮清洗液(20×)需使用去離子水1:20稀釋至工作濃度,去離子水不包含在試劑盒中,需實驗人員自備。
7. 終止液為酸性溶液,具有輕微腐蝕性,使用時避免接觸皮膚、眼、耳、口等暴露部位,如不慎接觸,使用大量清水沖洗后觀察接觸部位反應,如情節嚴重請及時就醫。
8. 試劑盒酶標板條可按需拆卸使用,已開封的試劑盒建議在1個月內使用,未開封的試劑盒以包裝盒上保質期為準。

組分和說明(Component and Instruction)

樣品清單及儲存條件

 

樣品名稱

規格

描述

推薦儲存條件

N蛋白預包板

96孔聚苯乙烯微孔板(12*8孔),預包被N蛋白。

密封狀態放置于-20℃保存。

濃縮清洗液

25 mL 20×)濃度的清洗液(含防腐劑),臨用前用去離子水1:20稀釋至工作濃度。 

放置于4 保存。

陽性對照

1

12μL重組人源N蛋白抗體,濃度1mg/mL。

放置于-20 保存。

檢測溶液A

12μL 生物素標記的羊抗人二抗,臨用前用檢測溶液稀釋液1:1000稀釋至工作濃度。

放置于-20 保存。

檢測溶液B

12μL HRP標記的鏈酶親和素,臨用前用檢測溶液稀釋液1:2000稀釋至工作濃度。

放置于-20 保存。

樣本稀釋液

25 mL稀釋液(含防腐劑),用于陽性對照、血清、血漿的稀釋。

放置于4 保存。

檢測溶液稀釋液

25 mL稀釋液(含防腐劑),用于檢測溶液A,檢測溶液B的稀釋。

放置于4 保存。

顯色液

12 mL TMB(四甲基聯苯胺)。

放置于4 保存。

終止液

6 mL 2M 酸液。

放置于4 保存。

封板膜

用于實驗中封閉酶標板。

放置于常溫保存。

Note

For research use only .

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加
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