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蛋白質組學

樣品準備和寄送指南

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 ?。?)蛋白質組學樣品準備的一般原則
          a.確保樣品狀態良好,符合預期的表型或分子指標。
          b.帶手套、口罩、頭套進行操作,避免角蛋白污染。
          c.保證取材后的操作在冰上進行,并盡量操作迅速。
          d.依后續實驗需求,做好分裝,避免蛋白反復凍融。
          e.取材后,液氮速凍,- 80 ℃ 冰箱保存,干冰寄送。
 
 ?。?)蛋白質組學服務項目對樣品量的要求
 
 
          a.銀染或考染膠條:需條帶肉眼清晰可見。
          b.細胞:蛋白質組學項目需1×106或體積>30 μL;磷酸化蛋白質組學項目需1×107。
          c.動物組織:蛋白質組學項目需鮮重100 mg;磷酸化蛋白質組學項目需500 mg。
          d.植物組織:蛋白質組學項目需鮮重200 mg;磷酸化蛋白質組學項目需1 g。
          備注:對于蛋白得率較低的樣品,建議在條件允許的情況下,適當提高樣品送樣量;特殊樣品,請聯系公司技術人員                協商送樣量。
 
 ?。?)常見類型樣品的準備流程
         a.膠條樣品:將蛋白條帶用干凈的刀片切下,并切割為長寬高約1 mm的小塊,裝入進口EP管中及時送樣,送樣時需加
             冰袋維持低溫。
         b.蛋白溶液樣品:最好測定蛋白濃度后,干冰寄送液氮速凍的蛋白溶液(需指明緩沖
         液成分和濃度);或將蛋白通過TCA法或丙酮法沉淀,晾干后,干冰或冰袋寄送。
         c.細胞、細菌、真菌樣品:用預冷的PBS緩沖液清洗三次,去除培養基殘留成分,清洗結束后,離心將上清棄去,液氮
             速凍后,-80 ℃保存,或干冰寄送。
         d.動物組織樣品:取材后冰上操作,迅速將組織剪成長寬高分別為0.5 cm的小塊,用預冷PBS清洗三遍,去除殘留血
             液,稱重后,液氮速凍,-80 ℃保存,或干冰寄送。
         e.植物組織樣品:新鮮取材后,用預冷的PBS將材料表面污物去除,稱重后,液氮速凍,-80 ℃保存,或干冰寄送。
         f.培養基上清液:培養細胞至合適密度,用無血清培養基清洗三遍后,加入無血清培養基繼續培養合適時間,收集培養
            上清,離心去除細胞后,使用0.22 μm的濾膜過濾,液氮速凍后,-80 ℃保存,或干冰寄送。
        g.血液樣品:血液樣品一定避免溶血,要求采集血液時同時制備為血清或者血漿樣品,建議使用相應的采血管,之后                通過離心的方式獲得血清或血漿,按需求分裝后,液氮速凍,-80 ℃保存,或干冰寄送。
          h.IP樣品:關于IP樣品制備與注意事項,可向公司索取“IP-MS樣品制備實驗指南”。
 
      (4)送樣信息表
 
 
       送樣信息表下載地址為:https://pan.baidu.com/s/106P82ybLHZJIYY8fnoTWNw
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