搜索

159-2642-3062

服務熱線(工作日:9:00-17:30)

武漢科斯坦生物科技有限公司

熱搜詞:燕窩酸,不飽和脂肪酸,神經酰胺,花青素,黃酮,皂苷

Wuhan Chemstan Biotechnology Co., Ltd.

武漢科斯坦生物科技有限公司

代謝組學

分析測試

抗體/蛋白

地       址:武漢市東湖新技術開發區高新大道666號,武漢

                 國家生物產業基地B、C、D區研發樓C1棟
產品銷售:15926423062
技術服務:18971263062                                             
E - mail :
info@chemstan.com       
郵       編:430075

化合物單體

科斯坦生物(Chemstan)所有產品和服務僅用于科學研究,不為任何個人或者非科研性質的用途提供產品和服務。

Copyright @ 武漢科斯坦生物科技有限公司.All rights reserved

網站建設:中企動力武漢鄂ICP備19006850號-1

>
>
>
>
基于標記的定量蛋白質組學分析

蛋白質組學

基于標記的定量蛋白質組學分析

瀏覽量

 ?。?)背景介紹
  蛋白質是基因表達產物,在生物體內直接行使功能,因此研究其在各種刺激條件下的變化,為疾病發生等生理過程提供了重要線索。隨著質譜技術發展,高通量蛋白質定量分析日臻完善,一輪實驗周期往往可獲取數千種蛋白的定量信息。
  目前基于標記的定量蛋白質組學方法可分為化學標記和代謝標記。常用的化學標記如iTRAQ標記和Dimethyl標記,通過標記試劑與酶解后肽段的游離氨基進行反應得以實現。iTRAQ標記可同時比較多達八組樣品,Dimethyl可同時比較3組樣品。代謝標記通常指SILAC,是通過在培養基中添加穩定同位素標記的氨基酸,細胞在生長過程中蛋白質即可被標記。
 
 ?。?)實驗流程
 
 
 ?。?)案例分析
  a.目的
  定量分析正常細胞X0和其低氧處理組X1間差異表達蛋白質。為了實現這一目標,采用iTRAQ試劑中114和115標簽分別標記X0和X1細胞中抽提的全蛋白,然后混合進行質譜分析,在蛋白定性的同時通過比較114和115標簽強度的高低對蛋白進行定量,為下一步功能研究提供候選靶標對象。
 
  b.步驟
 
 
  c.結果
  兩次生物學重復共鑒定到7353個蛋白,其中5030個蛋白含有定量信息,并且兩次生物學重復具有很好的相關性。隨后對差異表達的蛋白進行了一系列生物信息分析,結果如下:
 
 
 ?。?)參考文獻
  ● Multiplexed protein quantitation in Saccharomyces cerevisiae using amine-reactive isobaric tagging reagents. Molecular & Cellular Proteomics 2004.
 
  ● Multiplex peptide stable isotope dimethyl labeling for quantitative proteomics. Nature Protocols 2009.
 
  ● Widespread proteome remodeling and aggregation in aging C. elegans. Cell 2015.
 
上一篇:
下一篇:
女人18毛片a级毛片